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飞朔生物测序服务助力成人胃孤立性朗格汉斯细胞组织细胞增生症治疗研究

新闻来源: 发布时间:[2023-09-22]

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近日,中华病理学杂志发表了《成人胃孤立性朗格汉斯细胞组织细胞增生症3例临床病理学分析》短篇论著,并引发了广泛关注。主要探讨成人胃孤立性朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)的临床表现、病理特征、免疫表型、分子病理、鉴别诊断及治疗预后。飞朔生物为此次研究提供高通量测序技术对BRAF、KRAS和NRAS基因的热点突变区进行检测和分析。再次证实飞朔生物具有领先可靠的质控检测能力,可为临床开展精准诊疗提供强有力的保障。


以下引用本文


成人胃孤立性朗格汉斯细胞组织细胞增生症3例临床病理学分析


陈希1 袁静萍1 赵丽娜1 何惠华1 敖启林2 鞠仙莉1 陈芳芳1

1 武汉大学人民医院病理科,武汉 430060;


2 华中科技大学同济医学院附属同济医院病理

研究所,武汉 430030

通信作者:陈芳芳


摘要

目的:探讨成人胃孤立性朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)的临床表现、病理特征、免疫表型、分子病理、鉴别诊断及治疗预后。

方法:分析3例胃孤立性LCH的临床病理特点、免疫表型及分子病理等,并总结相关文献。

结果:例1男,23岁,胃镜发现胃窦体交界前壁有一息肉样隆起;例2男,22岁,胃镜发现胃体小弯侧有一隆起糜烂灶;例3男,46岁,胃镜发现胃体上段有一充血糜烂灶、中段有一息肉。3例镜下均见异常增生的朗格汉斯细胞,细胞中等大小,胞质略嗜酸性,核卵圆形,可见核沟,背景里有大量炎性细胞浸润,免疫组织化学 CD1α、Langerin、S‐100 蛋白均为阳性。例 2、3检测出BRAF V600E基因突变。3例均行胸腹部CT或正电子发射计算机断层扫描(PET‐CT)排除其他系统LCH。

结论:胃孤立性LCH非常罕见,预后良好,经验不足的医师对本病的诊断要点往往了解不充分,应注意与低分化腺癌鉴别,避免误诊为恶性肿瘤。

基 金 项 目 :武 汉 市 科 技 计 划 项 目(2017060201010172);武 汉 大 学 人 民 医 院 引 导 基 金(RMYD2018M27)


朗格汉斯细胞组织细胞增生症(Langerhans cell histiocytosis,LCH)是一种以朗格汉斯细胞异常增殖为特征的少见疾病[1],多发生于儿童,常累及多系统[2],发生于成人的胃孤立性LCH罕见,研究尚不充分。此次研究收集3例成人胃孤立性LCH,并复习相关文献,探讨成人胃孤立性LCH的临床病理学特征、免疫表型、分子病理及鉴别诊断,旨在提高临床和病理医师对该疾病的认识。



一、资料与方法


1.病例资料:收集武汉大学人民医院病理科和华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所2017年12月至2022年12月3例确诊为成人胃孤立性LCH患者的临床病理资料,分析其组织学形态、免疫表型、分子病理,并进行随访。


2.方法:标本经3.7%中性甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋,4 μm厚切片,行HE染色,光镜观察。免疫组织化学采用 EnVision 法 ,所 用 抗 体 购 自 Dako 公 司 ,包 括 CD1α、Langerin、S‐100 蛋白、cyclin D1、Ki‐67、广谱细胞角蛋白(CKpan)、CD56、嗜铬粒素 A(CgA)、突触素、p53、CD20、CD79α、CD3、CD30、HMB45、Melan A、SOX10,均为即用型抗体。用高通量测序技术对BRAF、KRAS和NRAS基因的热点突变区进行检测,检测平台为DA8600二代测序仪,由厦门飞朔生物技术有限公司提供测序服务。


二、结果


1)临床资料:例1男,23岁,因“胸痛、胸腔闭式引流术后18d”入院治疗,胃镜检查示:胃窦体交界前壁可见息肉样隆起,大小约0.3 cm×0.3 cm,表面光滑,边界清楚,质软,余未见明显异常。例2男,22岁,因“饥饿痛3d”入院就诊,胃镜检查示:胃体小弯侧见一隆起糜烂灶,质软,余未见明显异常。例3男,46岁,因“间断上腹胀2个月”入院,胃镜检查示胃体上段近贲门见一充血糜烂灶,中段大弯侧见一大小0.3 cm×0.3 cm息肉,余未见明显异常。


2)病理学检查:(1)大体检查:例1,灰白组织一块,直径0.2 cm。例2,灰白组织一块,直径0.3 cm。例3,灰白组织2块,直径0.2~0.3 cm。(2)组织学特点:3例均于胃黏膜固有层内(图1)见异常增生的朗格汉斯细胞巢片状分布。细胞中等大小,胞质略嗜酸性,核卵圆形,核仁不清晰,可见核沟;背景中见嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞等炎性细胞(图2)。(3)免疫组织化学:3例CD1α(图3)、Langerin(图4)、S‐100蛋白均阳性(图5),Ki‐67阳性指数均约20%(图6),CKpan 均阴性。例1,CgA、CD56、突触素、CD20、CD79α、CD3、CD30、HMB45、Melan A、SOX10 均阴性;例2,cyclinD1(图7)阳性,突触素、CD56、CgA阴性,p53个别细胞阳性(图8);例3,cyclin D1阳性,p53个别细胞阳性。(4)基因检测:例2、3原发灶均检测出BRAF V600E基因突变,而KRAS和NRAS基因未突变。



图1 胃孤立性朗格汉斯细胞组织细胞增生症,肿瘤细胞周围有较密集的胃黏膜固有层的腺体 HE 低倍放大 图2 肿瘤细胞可见典型的咖啡豆样核,背景大量炎性细胞浸润 HE 中倍放大 图3 朗格汉斯细胞 CD1α 阳性 EnVision 法 中倍放大 图4 朗格汉斯细胞 Langerin 阳性 EnVision 法 中倍放大 图5 朗格汉斯细胞 S‐100 蛋白阳性 EnVision 法 中倍放大 图6 朗格汉斯细胞 Ki‐67阳性指数约 20% EnVision 法 中倍放大 图7 朗格汉斯细胞 cyclin D1阳性 EnVision 法 高倍 放大 图8 朗格汉斯细胞p53个别细胞阳性 EnVision法 中倍放大。


3)其他检查:例1、3术后复查胸部及腹部CT均未见明显异常。例2行骨髓检查未见肿瘤细胞且骨髓中未检测到基因突变,另行全身正电子发射计算机断层扫描(PET‐CT)未见明显异常。3例均排除了其他系统累及,为孤立性。


4)治疗及随访:例1及例3患者行活检后保守治疗,随访至今,情况良好。例2患者行活检后复查胃镜并行内镜黏膜下剥离术(ESD)治疗,术中见胃体小弯有一大小1.2 cm×0.8 cm的糜烂灶,术后病检组织全部取材未见肿瘤细胞,随访6个月~5年患者情况均良好。



三、讨论


既往LCH被认为是3种独立的疾病:骨嗜酸性肉芽肿、Letterer‐Siwe病和Schüller‐Christian病。因三者在临床病理学特征上有诸多共同点,1953年Lichtenstein[3]将它们统称为组织细胞增生症X。1973年,有学者发现,组织细胞增生症X的特征是朗格汉斯细胞在局部或全身的异常增殖和播散,因此1987年国际组织细胞协会协作组建议将组织细胞增多症X重新命名为LCH[4‐5]


LCH的病变累及范围多变,临床上分为单灶单系统、多灶单系统和多灶多系统3类[6] ,其中单发于胃的成人LCH极其罕见,我们在万方和PubMed数据库中检索到15例[6-13],患者年龄28~68岁,男女比例为8∶7。其中8例无症状,7例患者有包括胃部不适(3 例)、上腹痛(2 例)、吞咽困难(1例)、恶心/呕吐(1例)等胃肠道症状。10例于胃镜下见孤立性隆起或息肉(大小0.2~1.0 cm),1例为多发息肉,其他病变包括糜烂(2例)和溃疡(1例),只有1例没有病变。部位以胃体多见(7例),其他部位有胃窦(4例)、胃底(1例)、胃角(1例),还有1例胃体和胃底均有病变,1例病变弥漫分布于全胃。本组病例,例1无相应胃肠道症状,例2表现为饥饿痛,例3表现为上腹胀,3例均为男性,年龄分别为22、23、46岁,胃镜下均为位于胃体的孤立息肉或隆起。3例的临床特点与既往报道的病例相似,发病年龄则更为年轻,拓宽了其发病的年龄范围。


有研究提出诊断LCH的要点是:具有特异的镜下表现和相关的临床/影像学表现,并至少行CD1α和Langerin两种免疫组织化学检测[14]。组织学上,LCH的特征是异常增生的朗格汉斯细胞巢片状分布,细胞中等大小,核圆形或卵圆形,核仁不明显,核膜褶皱,有咖啡豆样核沟,胞质略嗜酸性[15]。背景里常有嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞等反应性炎性细胞浸润。在免疫组织化学中,肿瘤细胞特异性表达 CD1α、S‐100 蛋白和 Langerin。另有关于皮肤 LCH 的研究发现,92.3%~100%的病例中肿瘤细胞核强表达cyclin D1,阳性率 5%~70%,而反应性病变中 cyclin D1 均阴性表达[16-18] 。这表明cyclin D1可用于鉴别LCH和反应性病变。而目前还没有cyclin D1在胃孤立性LCH中的阳性率的研究报道,对于cyclin D1的阳性判读也没有统一标准。本组中例2及例3的cyclin D1阳性率分别为10%、30%。此外,在新近的研究中建议对 LCH 患者行全身氟代脱氧葡萄糖PET‐CT,包括远端肢体,以帮助确定疾病的范围及程度。本组3例病例在镜下特点、免疫组织化学及影像学结果均符合以上要求。


成人LCH可能具有的分子特征包括:(1)BRAF V600E突变;(2)RAS‐RAF‐MEK‐ERK 通路中的其他激活突变;(3)激活激酶融合[14]。其中BRAF V600E突变在超过一半的LCH病例中存在[18] 。在检索到的15例病例中,只有6例进行了BRAF V600E突变检测,其中有5例出现突变。在本组中例2、3用高通量测序技术检测出BRAF V600E基因存在突变,但KRAS、NRAS基因没有突变。结合既往病例和本组2例病例,成人胃孤立LCH的BRAF V600E的突变比例为7/8,更多数据有待进一步研究。


本病的鉴别诊断为:(1)Erdheim‐Chester病:镜下示轻度黄色肉芽肿性炎症和不同程度的纤维化,常强表达ⅩⅢa因子和 CD163,不表达 S‐100 蛋白;(2)Rosai‐Dofman病:肿瘤细胞缺乏核沟,表达S‐100蛋白和CD163;(3)低分化癌:肿瘤细胞异型性大,核分裂象多见,表达 CKpan;(4)淋巴瘤:肿瘤细胞表达相应的B细胞、T细胞的标志物,不表达S‐100蛋白。以上4种疾病均不表达CD1α和Langerin。需要注意的是,LCH的Ki‐67阳性指数变化较大,本组3例阳性指数均约20%,而既往报道病例中最高可达60%[8],切忌误诊为恶性肿瘤。


LCH的预后与受累器官数、受累危险器官数及发病密切相关[19] ,单灶、单系统LCH患者一般只需局部切除或观察。既往15例胃孤立性LCH病例,分别行手术切除(2例)、ESD(4例)或活检检查(9例),随访时间从3个月到5.5年,随访期间情况良好。本组中例1、3活检后观察,例2患者行活检及ESD治疗,3例患者随访6个月至5年情况均良好,这与既往报道治疗手段和预后一致。


由上可知,成人胃孤立性LCH罕见,大多数患者无症状或有较轻的胃肠道症状,胃镜下多为孤立性息肉或隆起。镜下特点、免疫组织化学、全身PET‐CT排除其他系统累及和分子病理提示BRAF V600E基因突变是确诊此病的必要手段。治疗一般为局部切除或活检观察,总体预后良好。因镜下特点还有Ki-67阳性指数变化大,应避免误诊为低分化癌等恶性肿瘤。


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